主页 > 北京28咨询 >

荧光显微成像技术和应用

鏂囨。鏉ユ簮锛毼粗  鏂囨。浣滆咃細admin  鍙戝竷鏃堕棿锛2019-07-28 鐐瑰嚮锛197  

荧光显微成像技术和应用_物理_自然科学_专业资料。荧光显微技术和应用 12级生物科学 邱修明 原理 ?普通光学显微镜 通过普通光源的照明观察标本 荧光显微镜(fluorescence microscope): 利用较短波长的光(激发光)照 荧光显微技术和应用 12级生物科学 邱修明

  荧光显微成像技术和应用_物理_自然科学_专业资料。荧光显微技术和应用 12级生物科学 邱修明 原理 ?普通光学显微镜 通过普通光源的照明观察标本 荧光显微镜(fluorescence microscope): 利用较短波长的光(激发光)照

  荧光显微技术和应用 12级生物科学 邱修明 原理 ?普通光学显微镜 通过普通光源的照明观察标本 荧光显微镜(fluorescence microscope): 利用较短波长的光(激发光)照射样品, 使样品受到高能量激发,产生较长波长的 荧光(发射光),用来观察和分辨样品中产 生荧光的物质的成分和位置。 荧光显微镜的种类 ?透射式 ●落射式 透射荧光显微镜原理图 目镜 吸收滤色镜 物镜 标本 暗场聚光镜 汞灯 激发滤色镜 落射荧光显微镜原理图 吸收滤色镜 汞 灯 分色镜 物 镜 激发滤色镜 标 本 荧光显微镜的主要部件 透射式 ?汞灯光源 ?激发滤色镜 落射式 ?汞灯光源 ?激发滤色镜 ?分色镜 ?吸收滤色镜 ?暗场聚光镜 ?吸收滤色镜 ?分色镜 反射激发光,透过荧光 ?暗场聚光镜 来自下面光源的光线经过暗场聚光镜,形成了横过显微镜视野而不进 入物镜的强烈光束。因此视野是暗的 荧光图像的记录方法 荧光显微镜所看到的荧光图像具有: 形态学特征和荧光的颜色、亮度 判断结果时,必须将二者结合起来综合判断 记录结果:主观指标(即工作者目力观察) 客观指标(细胞分光光度计、图像分析仪等) 荧光显微镜应用技术 1. 对细胞结构或组分的定性位、半定量研究 免疫荧光技术 用荧光标记的抗体或抗原与样品(细胞、组织或分离的物质等)中相应的 抗原或抗体结合,以适当检测荧光的技术对其进行分析的方法。将抗原或 抗体与荧光染料连接,用于检测相应特异性的抗体或抗原的方法称“直接 免疫荧光技(directimmunofluorescent technique)”。用荧光染料标记的 第二、第三抗体等检测相应抗原抗体复合体的方法则称“间接免疫荧光技 术(indirect immunofluorescent technique)”。 由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出,从而可对抗原进 行细胞定位 ?2.作为生物大分子筛选与鉴定的标记物。 绿色荧光蛋白 绿色萤光蛋白(green fluorescent protein),简称 GFP,其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的 光线激发下,会发出绿色萤光,在生物学研究中绿 色荧光蛋白具有广泛用途,包括有 ? 1.分子标记 利用绿色荧光的发光机制,可将GFP作为蛋白质 标签(protein tagging),即利用DNA重组技术,将 目的基因与GFP基因构成融合基因,转染合适的细 胞进行表达,然后借助荧光显微镜便可对标记的蛋 白质进行细胞内活体观察 2.药物筛选 荧光探针分布是利用信号传导中信号分子 的迁移功能,将一荧光蛋白与信号分子相偶联, 根据荧光蛋白的分布情况即可推断信号分子的 迁移状况,并推断该分子在迁移中的功能。由 于GFP分子量小,在活细胞内可溶且对细胞毒 性较小,因而常用作荧光探针 谢 谢

  
鍏充簬鎴戜滑    骞垮憡鏈嶅姟    缃戠珯鏈嶅姟    甯姪涓績  閭欢鑱旂郴

鏈珯鎵鏈夊唴瀹癸紙鐗瑰埆璇存槑闄ゅ锛夋簮鑷綉缁滐紝濡傛湁渚垫潈锛岃鑱旂郴鎴戜滑鍒犻櫎銆

Copyright © 2002-2019 DEDECMS. 织梦科技 版权所有 Power by DedeCms